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甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料，属于醌亚胺染料类，这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。

• 第一次使用本试剂时建议先取1～2个样品做预实验。样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。
  
• 本制品推荐浓度为0.1%，具体使用浓度可自行稀释调整。
  
• 由于温度对染料的溶解度与着色力有很大的影响，若快速染色，当室温较低时，可以适当加温。
  
• 针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 石蜡切片染色
  
  • 切片脱蜡至蒸馏水。
    
  • 0.1%甲苯胺蓝染色液室温浸染或滴染5min。
    
  • 流水冲洗2min。
    
  • 去离子水浸泡2min×2次。
    
  • 常规脱水、透明、中性树胶封片，显微镜观察。
• 细胞涂片染色
  
  • 准备细胞涂片。
    
  • 用0.1%甲苯胺蓝染色液进行滴染，一般细胞涂片1～2min即可。
    
  • 蒸馏水或去离子水轻轻冲洗3～5min。
    
  • 晾干。
    
  • 镜检。
• 肥大细胞染色
  
  • 切片脱蜡至蒸馏水。
    
  • 根据切片厚度和组织的不同，浸染于0.1%甲苯胺蓝染色液5～30min。
    
  • 蒸馏水或去离子水轻轻冲洗3～5min。
    
  • (可选)0.5%冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
    
  • 快速95%和无水乙醇脱水，二甲苯透明，封固，显微镜观察。